Procédé de fabrication d'un liquide produit de culture

Method for manufacturing culture product liquid

培養生成液製造方法

Abstract

Le problème décrit par la présente invention consiste à fournir un procédé de fabrication d'un liquide produit de culture, moyennant quoi un liquide produit de culture est fabriqué comprenant un métabolite prédéterminé sécrété à partir d'un type unique de cellule souche. La solution selon l'invention est un procédé de fabrication d'un liquide produit de culture comprenant : l'extraction d'un liquide de moelle épinière de couche intermédiaire positionnée dans une couche intermédiaire à partir du liquide de moelle épinière séparé d'une manière stratifiée et la culture du liquide de moelle épinière de couche intermédiaire conjointement à un liquide de culture ; la fixation des premières cellules souches à une surface inférieure d'un premier récipient de culture et le recueil des premières cellules souches du premier récipient de culture lorsque la surface totale des premières cellules souches atteint un premier rapport cible de la surface inférieure du premier récipient de culture ; la culture des secondes cellules souches conjointement au liquide de culture, les secondes cellules souches étant positionnées dans une couche de fond parmi les premières cellules souches séparées d'une manière stratifiée, tout en recueillant les secondes cellules souches ; et la fixation des secondes cellules souches à la surface inférieure d'un second récipient de culture, et l'extraction d'un liquide produit de culture comprenant un métabolite prédéterminé sécrété à partir d'un type unique de secondes cellules souches cultivées à partir du second récipient de culture lorsque la surface totale des secondes cellules souches atteint un second rapport cible de la surface inférieure du second récipient de culture.
【課題】単一種の幹細胞から分泌された所定の代謝物質を含む培養生成液を製造する培養生成液製造方法を提供する。 【解決手段】培養生成液製造方法は、層状に分離した骨髄液のうちの中間層に位置する中間層骨髄液を抽出し、中間層骨髄液を培養液ともに培養して第1幹細胞を第1培養容器の底面に定着させ、第1幹細胞の総平面面積が第1培養容器の底面面積に対して第1目標割合に達した場合、第1培養容器から第1幹細胞を採取し、層状に分離させた第1幹細胞のうちの最下層に位置する第2幹細胞を採取しつつ、第2幹細胞を培養液とともに培養して第2幹細胞を第2培養容器の底面に定着させ、第2幹細胞の総平面面積が第2培養容器の底面面積に対して第2目標割合に達した場合、増殖した単一種の第2幹細胞から分泌された所定の代謝物質を含む培養生成液を第2培養容器から抽出する。
[Problem] To provide a method for manufacturing a culture product liquid, whereby a culture product liquid is manufactured which includes a predetermined metabolite secreted from a single type of stem cell. [Solution] The method for manufacturing a culture product liquid according to the present invention comprises: extracting an intermediate-layer bone marrow liquid positioned in an intermediate layer from bone marrow liquid separated in layered fashion and culturing the intermediate-layer bone marrow liquid together with a culture liquid; fixing first stem cells to a bottom surface of a first culture container and collecting the first stem cells from the first culture container when the total area of the first stem cells reaches a first target ratio of the bottom-surface area of the first culture container; culturing second stem cells together with the culture liquid, the second stem cells being positioned in a bottom layer from among the first stem cells separated in layered fashion, while collecting the second stem cells; and fixing the second stem cells to the bottom surface of a second culture container, and extracting a culture product liquid including a predetermined metabolite secreted from a single type of second stem cells grown from the second culture container when the total area of the second stem cells reaches a second target ratio of the bottom-surface area of the second culture container.

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Patent Citations (4)

    Publication numberPublication dateAssigneeTitle
    JP-2006109757-AApril 27, 2006Olympus Corp, オリンパス株式会社Method for culturing marrow-derived mesenchymal stem cell
    JP-2015084686-AMay 07, 2015オリンパス株式会社, Olympus CorpJig for cell culture, and automatic culture medium exchange system
    WO-2011111787-A1September 15, 2011株式会社ツーセルCell preparation containing mesenchymal stem cells, and method for producing same
    WO-2015021189-A1February 12, 2015Regenerative Sciences, LlcBone marrow adipose portion isolation device and methods

NO-Patent Citations (2)

    Title
    GIJUTSU KAIHATSUBU ET AL.: "3 Jido Baiyo Sochi no Kaihatsu", FUKUOKA INDUSTRY, SCIENCE & TECHNOLOGY FOUNDATION, SANGAKUKAN KYODO KENKYU KAIHATSU JIGYO KENKYU SEIKA HOKOKUSHO, JIKO SOSHIKI YURAI KANSAIBO DELIVERY SYSTEM O OYO SHITA UNDOKI SAISEI IRYO NO KAIHATSU, 2006, pages 11 - 18, [retrieved on 20170523]
    YUKIO NAKAMURA: "Mokutekibetsu de Eraberu Saibo Baiyo Protocol", EXPERIMENTAL MEDICINE SEPARATE VOLUME, 20 March 2012 (2012-03-20), pages 139 - 146

Cited By (0)

    Publication numberPublication dateAssigneeTitle